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    無血清培養(yǎng)基更換后細(xì)胞大量死亡的原因探究

    發(fā)布時(shí)間: 2022-02-14  點(diǎn)擊次數(shù): 1296次
       無血清培養(yǎng)基(SFM)是不需要添加血清就可以維持細(xì)胞在體外較長時(shí)間生長繁殖的合成培養(yǎng)基。但是它們可能包含個別蛋白或大量蛋白組分。雖然基礎(chǔ)培養(yǎng)基加少量血清所配制的*培養(yǎng)基可以滿足大部分細(xì)胞培養(yǎng)的要求,但對有些實(shí)驗(yàn)卻不適合,如觀察一種生長因子對某種細(xì)胞的作用,這時(shí)需要排除其他生長因子的干擾作用。而血清中可能含有各種生長因子;又如需要測定某種細(xì)胞在培養(yǎng)過程中分泌某種物質(zhì)(抗體、生長因子)的能力;或者要大規(guī)模的培養(yǎng)某種細(xì)胞,以獲得它們的分泌產(chǎn)物。因此研制出無血清培養(yǎng)基一直是生物科學(xué)工作者努力的目標(biāo)。
      科研實(shí)驗(yàn)使用轉(zhuǎn)染細(xì)胞在轉(zhuǎn)染前要換上無血清培養(yǎng)基。本來?xiàng)l件好好的,轉(zhuǎn)染效率也可以接受。但是過了一段時(shí)間就發(fā)生了細(xì)胞在有血清的培養(yǎng)基中長的好好的,一換無血清的培養(yǎng)基就死亡的現(xiàn)象。大概4個小時(shí)就能看到較多的細(xì)胞飄起來。換了不同批次的培養(yǎng)基,但仍不行,這是怎么回事呢?
      解析:
      1.兩周后的培養(yǎng)液應(yīng)補(bǔ)加谷氨酰胺,或者重新配液,轉(zhuǎn)染時(shí)應(yīng)不含抗生素。
      2.確認(rèn)操作方法和環(huán)境,建議檢查一下。
      3.脂質(zhì)體的毒性很大,如果有質(zhì)粒參與對細(xì)胞損傷更大,如果在常溫放置過,對細(xì)胞更大,假期冰箱是否斷過電。
      4.培養(yǎng)箱的溫度、CO2濃度,濕度等。
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